Diagnóstico Molecular de Infecciones Virales: Accesible o aún debemos esperar

October 17, 2017 | Autor: Pat Seria | Categoría: Viral Infection
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Descripción

Diagnóstico Molecular de Infecciones Virales: Accesible o aún debemos esperar? RESUMEN TERCEROS, A. Patricia T. TERRAZAS, A. Katty 1

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En la pasada década la amplificación de secuencias nucleicas fue desarrollada como una herramienta de investigación. En la actualidad estos procedimientos son reportados en la detección y monitoreo de varias patologías, entre ellas las enfermedades causadas por virus. La presente revisión, examina la aplicación de estas técnicas en el diagnóstico de las enfermedades virales, asimismo discute sus ventajas y limitaciones en comparación con procedimientos convencionales.

ABSTRACT In the past decade, nucleic acid amplification was developed as research tool; now it is reported in the detection of several pathologies including those caused by viruses. This review, focus on the application of this technology to the diagnosis of viral infections and discuss about advantages and limitations compared with conventional tools. INTRODUCCIÓN 1 Laboratorio de Virología, Instituto de Servicios de Laboratorio de diagnóstico e Investigación en Salud (SELADIS). Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, UMSA Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, UMSA

PALABRAS CLAVE Diagnóstico molecular, Infecciones Virales, Reacción en Cadena de la Polimerasa, Hepatitis virales, Herpes virus, Enterovirus, Virus Sincitial respiratorio, Adenovirus, Influenza, Parainfluenza

Vol. XII - Noviembre de 2004

La aplicación de las técnicas moleculares de detección y amplificación de secuencias específicas de DNA o RNA es extensamente variada. Un beneficio notable de su uso en diagnóstico es la identificación de patologías de origen oncológico, genético o infeccioso. En enfermedades infectocontagiosas las técnicas como Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), Reacción en Cadena de la Ligasa (LCR), Branched DNA (bDNA), hibridación, etc. han permitido detectar agentes que no pueden observarse directamente, especialmente aquellos que son de difícil crecimiento en cultivos, microorganismos de desarrollo lento o que se encuentran en pequeña concentración y donde las técnicas convencionales de detección de antígenos y/o anticuerpos carecen de suficiente sensibilidad y especificidad diagnóstica (1,2,3,21,51). Estos procedimientos que empezaron en laboratorios de investigación han sido desarrollados para facilitar su uso y mejorar su costo y en la actualidad, son parte de las herramientas utilizadas rutinariamente para el diagnóstico de enfermedades infecciosas. La presente revisión tiene como propósito examinar la utilidad de estas técnicas en el diagnóstico de las enfermedades virales de BIOFARBO - (67)

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mayor importancia en nuestro medio y asimismo discutir sus ventajas y limitaciones y la posibilidad de su acceso local para el diagnóstico. Técnicas Moleculares más comúnmente usadas en el Diagnostico Viral La técnica más utilizada para diagnóstico, entre los métodos moleculares, es la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) que puede detectar específicamente la presencia de una serie de virus, tales como Adenovirus, Herpes simplex, Citomegalovirus, EpsteinBarr virus, Enterovirus, Hepatitis C, HIV, Dengue virus, etc (5,14,25,26,45.48). Brevemente, el proceso consiste en la extracción del ácido nucleico (DNA o RNA) a partir de un espécimen (sangre, orina, líquidos corporales, tejidos, células, etc). Luego, se inicia la PCR propiamente dicha o amplificación del genoma blanco, para esto se utilizan primers específicos para una determinada secuencia del genoma que se quiere amplificar y la enzima Polimerasa para la síntesis de fragmentos de DNA (1,2,3,51). El proceso de amplificación es repetido numerosas veces; donde las nuevas secuencias sintetizadas actúan a su vez como nuevas secuencias blanco, dando como producto final millones de copias del genoma original. La etapa final consiste en la detección del producto amplificado, para esto existen varias estrategias; los amplicones pueden ser visualizados por electroforesis en gel de agarosa, por ensayo inmunoenzimático (PCR-ELISA) o por detección de emisiones fluorescentes (Real time- PCR) (1,2,51) (Figura 1).

En la actualidad, existen variantes de este método. PCR-multiplex, por ejemplo, incluye distintos primers específicos para una determinada secuencia genómica, esto permite la amplificación y detección de varios patógenos al mismo tiempo (5,43,51,52). La RT-PCR que utiliza como secuencia blanco el RNA, en este caso actúa inicialmente la transcriptasa reversa, enzima que convierte la secuencia RNA en una cadena complementaria de DNA copia (DNAc), el DNAc puede ser amplificado posteriormente por el PCR estándar (45,51) . Esta técnica es utilizada para determinar la presencia de RNA ribosomal o mensajero que puede estar presente específicamente durante un determinado periodo de la enfermedad (infección activa, latencia, etc), o para la detección de Virus RNA. El PCR-ELISA no presenta variante en el proceso de amplificación, sino en la detección de amplicones. El ensayo esta basado en el mismo principio de un ensayo inmunoenzimático; para esto los amplicones marcados con biotina hibridan con sondas fijadas a los micropocillos de Elisa, formado el complejo sondaamplicón. El híbrido es detectado por un conjugado que se compone de estreptavidina-enzima, el que en presencia del sustrato y la inclusión de un cromógeno desarrolla una coloración. La intensidad de color es medida en un lector de ELISA convencional (Figura 2). Para diagnóstico, este sistema ha demostrado ser mucho más sensible que la corrida electroforética, debido a que permite amplificar más el proceso de detección y de este modo realizar un ensayo cuantitativo lo que es muy importante en algunas virosis (1,2,51).

FIGURA 1 Proceso esquemático de la PCR

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DIAGNOSTICO MOLECULAR DE INFECCIONES VIRALES

FIGURA 2 PCR - ELISA

El diagnóstico molecular de infecciones virales de importancia local En la presente revisión se incluyen aquellas patologías de origen viral de importancia en nuestro medio y para las que existen estudios suficientes de aplicación de ensayos moleculares al diagnóstico. Estos estudios han permitido el desarrollo de las técnicas lo que facilita su acceso y disminuye sus costos haciendo posible su aplicación local para el diagnóstico. Diagnóstico de Infecciones Herpéticas La familia Herpesviridae incluye virus como Herpes simplex (HSV), Citomegalovirus (CMV), Epstein-Barr virus (EBV) y Varicela Zoster Virus (VZV). Estos virus son de mucha importancia para el hombre debido a que una vez que se contraen pueden desarrollar patologías de diversa gravedad y que requieren de tratamiento a lo largo de la vida. La amplificación del gen de la enzima Polimerasa Viral permite la detección simultánea de varios miembros de esta familia (HSV tipo 1 y 2, VZV, CMV, EBV, HHV-6); esto debido al 80% de homología de este gen (41). Esta homología es utilizada para realizar una amplificación con primers comunes permitiendo la identificación de cualquier miembro de esta familia. Posteriormente, para la identificación de cada uno de los virus se utilizan las regiones de baja homología a través de sondas específicas. Esta estrategia conjuntamente con el PCRMultiplex han resultado de mucha ayuda en el diagnóstico en casos de coinfección, comúnmente visto Vol. XII - Noviembre de 2004

en esta familia y que en términos de tiempo requerido para el ensayo y costo / beneficio, es más útil en comparación con procedimientos convencionales como ensayos inmunoenzimáticos y de cultivo viral (41,52). Infecciones por Herpes simplex Tipo 1 y 2 El virus Herpes simplex es causante de un gran espectro de manifestaciones clínicas. Una de sus complicaciones se presenta a nivel del Sistema Nervioso Central; el virus puede afectar a infantes o adultos ocasionando una encefalitis necrotizante que incluye principalmente el lóbulo medio temporal y frontal inferior (7,8,9,13,15,16) . Hasta hace algun tiempo, el diagnóstico de esta patología estuvo basado en la clínica que presentaba el paciente, imagenología, detección de anticuerpos intratecales o cultivo viral de muestras de biopsias de cerebro; aunque estas herramientas no permiten un diagnóstico temprano y tampoco iniciar un tratamiento precoz. En la actualidad el diagnóstico de estas patologías se basa principalmente en la amplificación del gen de la enzima ADN Polimerasa o del gen Timidina kinasa virales (14,25,26) . El uso de esta Técnica para la evaluación de encefalitis por HSV tipo 1 o 2, ha demostrado ser importante en la práctica clínica y en la actualidad se constituye en la prueba gold Standard de diagnóstico (9,14,22,25,26,52) . La posibilidad de obtener una muestra de LCR y realizar la identificación de HSV por PCR al inicio de los síntomas cambió la utilidad del diagnóstico, aunque es necesario correlacionar los resultados con técnicas de imagen como la Resonancia magnética BIOFARBO - (69)

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nuclear (RMN) o Tomografía axial computarizada (TAC) y pruebas inmunoserologicas para el diagnostico diferencial (9,22,25,52). Infecciones por Citomegalovirus El Citomegalovirus posee un especial tropismo hacia fibroblastos, células epiteliales y leucocitos. En estas células puede producirse la replicación viral lítica o puede permanecer en estado episomal, con grandes periodos de latencia y reactivaciones ocasionales (10,11). El CMV se transmite por contacto con todo fluido biológico o por transplante de órganos de individuos infectados; aunque una importante proporción de infecciones es asintomática. El CMV esta asociado con síndromes severos que requieren tratamiento de por vida como la mononucleosis heterófilo negativas en adultos jóvenes; inclusiones citomegálicas en pequeños que adquirieron infección congénita; neumonía intersticial, retinitis, enfermedades febriles y colitis ulcerativa en pacientes inmunocomprometidos; hepatitis, linfocitosis atípicas en niños pequeños prematuros (10,11,12,18). En infecciones primarias en pacientes receptores de transplante o inmunocomprometidos el virus puede causar serias complicaciones (19,24); se ha reportado que este virus es capaz de modular la expresión de antígenos de histocompatibilidad, y por consiguiente el nivel de activación de leucocitos y células endoteliales en el aloinjerto demostrando una estrecha relación entre reactivación y daño de injerto (27,28,32,35,36,37). En pacientes con HIV, la replicación de CMV es utilizada para monitorear la severidad de la inmunodeficiencia y la respuesta al tratamiento. Se ha reportado que infecciones por CMV son altamente prevalentes en países en desarrollo, aunque no existen datos locales al respecto la detección o diagnóstico de CMV es importante en varias situaciones. La PCR en el monitoreo de la reactivación de CMV en pacientes inmunosuprimidos ha demostrado tener un alto grado de utilidad, el gen mayormente utilizado para la detección es la región promotora del gen pp65, que codifica una fosfoproteina con ubicación en la matriz nuclear y que corresponde a una proteína de expresión tardía, una serie de estudios reporta que la amplificación por PCR sería capaz de detectar reactivación viral o una primoinfección con 5 a 10 días antes de la aparición de los síntomas, evitando un daño al injerto (18,24,27,28,31,38,40,41) . De la misma se ha demostrado su utilidad en el diagnóstico de infecciones congénitas, con una especificidad y sensibilidad de 95 a 100% y una efectividad mayor a los métodos inmunoserológicos, o detección de antígenos por shell vial (27,31,38,41). Infecciones por Epstein-Barr Virus El virus Epstein-Barr es el agente etiológico de la mononucleosis infecciosa, se ha demostrado su relación con el desarrollo de varios linfomas malignos incluyendo (70) - BIOFARBO

neoplasias de la línea celular B como el Linfoma de Burkitt, linfoma tipo Hodgkin y no-Hodgkin, tumores epiteliales, carcinoma nasofaríngeo y cáncer gástrico (45, 52) . La mayor parte de los individuos adquieren la infección durante los primeros años de vida por medio de la saliva o utensilios infectados. El virus al ingresar infecta células epiteliales de la orofaringe y glándulas salivales; después de la primoinfección persiste de forma latente en el huésped con continuas reactivaciones a lo largo de la vida (42, 52, 53). El sitio de latencia se encuentra en las células B de memoria, que luego de su activación produce un continuo número de células infectadas en sangre periférica. Estudios recientes han reportado una relación de la reactivación viral con el rechazo de injerto en receptores de transplante, desordenes linfoproliferativos posttransplante y esclerosis múltiple (19, 45). El diagnóstico de infecciones por EBV es realizado mediante pruebas serológicas que tienen buena sensibilidad y especificidad, sin embargo debido a la variabilidad de respuesta individual no permiten diferenciar un proceso de reactivación de una primoinfección (53) . Como una alternativa se ha planteado el uso de la PCR para detectar antigenemia, así como también el PCR-cuantitativo para determinar la carga viral y predecir una reactivación. Varios estudios han demostrado gran sensibilidad de los procedimientos en pacientes sujetos a transplante como también en individuos inmunocompentes lo que permite prevenir o alertar severas complicaciones en un determinado grupo de pacientes otorgando resultados confiables (41, 45, 52) . Por otro lado, también se estudia la posibilidad de detección de RNA mensajero de proteínas virales, involucradas en la replicación del virus, por RT-PCR como marcador molecular de reactivación para prevenir el daño de injerto (41,45). Infecciones por Varicela Zoster Virus VZV produce dos tipos de patologías en el ser humano; la primoinfección denominada varicela que es una enfermedad altamente contagiosa y que casi el 80% de la población cursa en la primera década de vida (52, 53) . Una vez producida la primoinfección, el virus produce latencia alojándose en los ganglios trigémino y dorsal. Dependiendo del estado inmunológico se producen recidivas de la enfermedad; estas se presentan con nuevas erupciones vesiculares en el tronco y la región lumbar y en ocasiones también se presenta a lo largo del nervio trigémino denominado Herpes oftálmico (23, 52) . Estas reactivaciones son denominadas Herpeszoster y se presenta en el 10% del total de la población infectada. Si bien la infección no presenta mayores complicaciones, en pacientes inmunosuprimidos o en pacientes neonatos puede presentar formas complicadas o atípicas e incluso fatales como neumonitis, hepatitis y encefalitis recurrentes. Para la determinación de una infección primaria o la evaluación Vol. XII - Noviembre de 2004

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de los antecedentes de infección el diagnóstico se realiza por ensayos inmunoenzimáticos; mientras que para los casos atípicos se recomienda los ensayos moleculares para la detección del virus (51,52). Para esto se utilizan las técnicas de PCR que permiten amplificar regiones conservadas del gen de la polimerasa viral, común en todos los Herpesvirus, y luego la diferenciación con sondas específicas. Esta estrategia ha permitido detectar más casos de encefalitis causadas por VZV e inclusive coinfecciones con EBV, HSV o CMV. Estos hallazgos han catalogado a la PCR como la técnica de referencia para el diagnóstico de patologías relacionadas con el SNC causadas por VZV al igual que con los otros herpesvirus (2, 23, 52, 53). Diagnóstico de Infecciones por Enterovirus Existen mas de 67 serotipos de Enterovirus humanos responsables de una variedad de infecciones que van desde asintomáticas a infecciones fatales. Estos virus incluyen Poliovirus Tipo 1-3, Coxsackievirus A (con 23 tipos) Coxsackievirus B (Tipo B1-B6), Echovirus (31 tipos), Enterovirus (Tipos 68-71) y están relacionados con patologías como ataxia cerebelar, mielitis, poliomelitis, pericarditis, neumonía, exantema cutáneo y resfriado común. Asimismo, se ha visto que infecciones con virus Coxsackie B4 juegan un rol importante en la etiología de la diabetes mellitus tipo 1 y pancreatitis en adultos (23, 53). El diagnóstico es complicado debido a las múltiples posibilidades; el método convencional para el diagnóstico de estos virus era el aislamiento viral en cultivo celular de muestras de LCR, hisopado faríngeo o heces fecales (46). La sensibilidad de esta técnica es baja, sobre todo en muestras de LCR y tiene un tiempo promedio de cultivo de 7 a 10 días, exceptuando a los Coxsackievirus (tipos A1 a A6) que no pueden replicar en cultivo in vitro. Por otra parte, el aislamiento de enterovirus de muestras clínicas no indica necesariamente que sea el agente etiológico de la infección, ya que puede excretarse asintomáticamente por largos periodos de tiempo o puede tratarse de un virus vacunal (2, 3, 23). Dichas limitaciones en cuanto a tiempo de la prueba y utilidad diagnóstica han determinado la necesidad de introducir el ensayo de RT-PCR como método de detección, utilizando una de las regiones más conservadas del genoma de la región 5’ (untranslated) que permite detectar la mayor parte de los serotipos (3,23. 46). Si bien se ha visto que la sensibilidad de este ensayo puede estar afectada especialmente por la carga viral, su sensibilidad frente al cultivo viral resulta ser superior, demostrando una sensibilidad del 85% para PCR frente a un 24% por cultivo en muestras de LCR. Hoy en día se realizan una serie de estudios que evalúan los procedimientos de estandarización y el ensayo de RTPCR puede llegar a ser una herramienta de gran ayuda para clarificar el rol de los enterovirus en infecciones agudas y crónicas (46, 54, 55). Vol. XII - Noviembre de 2004

Diagnóstico de Infecciones por Virus Respiratorios Las infecciones respiratorias de origen viral son causadas principalmente por virus Syncitial respiratorio (RSV), Parainfleunza virus (PIV), Influenza (IV) o Adenovirus (AdV) (43,44,47). Dependiendo de la edad, las infecciones pueden causar severas deficiencias respiratorias que requieren de hospitalización. Si bien su diagnóstico es posible por detección directa de antígenos virales, existe un porcentaje de casos que requiere de confirmación por aislamiento viral en cultivo celular, lo que prolonga el tiempo de emisión del resultado y encarece el diagnóstico porque requiere de tantas lineas celulares como virus se sospeche (43,44,48). Para permitir una rápida y sensible detección de los tres mayores grupos de virus causantes de infecciones respiratorias se han desarrollado técnicas moleculares. Los estudios realizados permiten la detección de RSV, PIV 1, 2, 3 y adenovirus asociados a infecciones del tracto respiratorio, en un solo paso utilizando RT-PCR Múltiplex en muestras clínicas. La especificidad y sensibilidad esta entre el 95 al 100% para cada uno de los virus (43,44,47,48). Si bien la detección directa de antígenos es la técnica utilizada por su alta especificidad y sensibilidad, se realizan estudios para la introducción de Kits comerciales que permitan la detección molecular sistemática. Las ventajas que presentan, en términos de costo beneficio, rapidez, alta sensibilidad y especificidad, bajo volumen de muestra utilizada, y lo más importante la habilidad de detectar la presencia de mas de un virus respiratorio en una misma muestra, hacen posible su consideración para aplicación al diagnóstico (1,2,47,48). Diagnóstico de Infecciones por Adenovirus (AdV) Se ha determinado 49 serotipos de esta familia relacionados con infecciones en humanos (48). Los AdV afectan al hombre provocando desde faringoamigdalitis, traqueobronquítis, gastroenteritis, queratoconjuntivitis, hasta cistitis hemorrágica, cervicitis, uretritis, meningitis, encefalitis, miocarditis e inclusive infecciones generalizadas en pacientes inmunodeprimidos (48,49). Las técnicas mas accesibles para su diagnóstico son la Inmunofluorescencia directa (IFD) y ensayos inmunoenzimaticos (EIA) para detección de antígenos, aunque el rendimiento de estos ensayos no es comparable al obtenido con otros virus. Si bien el aislamiento viral se considera la prueba definitiva para demostrar su presencia, la calidad de muestra y el tiempo de incubación influyen en la sensibilidad (42.43.49). La introducción de la PCR para su detección utilizando el gen codificante de la proteína del hexón AD7 ha permitido la detección de la infección por adenovirus; el ensayo puede ser aplicado a todo tipo de muestras obteniendo resultados superiores a la detección de antígenos (IFD, EIA) o cultivo viral. La importancia de BIOFARBO - (71)

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su detección rápida radica en las complicaciones que se pueden presentar tanto en poblaciones competentes como inmunodeprimidas. En este último grupo la presencia de este virus en el medio ambiente es un factor importante para producir infecciones diseminadas. El rápido diagnóstico por PCR, a partir del tercer día post transplante, puede determinar un tratamiento precoz y evitar posibles infecciones nosocomiales (42,43,49,47,48). El Diagnóstico Molecular de Infecciones Virales en periodo Ventana y en Monitoreo de Infecciones crónicas El uso de procedimientos moleculares para el diagnostico de Infecciones causadas por virus de Hepatitis B, C, HIV sobre todo en bancos de sangre ha permitido controlar un factor de riesgo importante en patologías asociadas a transfusiones sanguíneas. Principalmente por sangre donada por individuos con infección en periodo ventana (4,5). En esta fase de la infección los métodos serológicos son incapaces de detectar antígenos virales y la respuesta humoral esta en fase inicial. En estos casos la aplicación de técnicas moleculares tales como la PCR múltiplex para Hepatitis B, Hepatitis C y HIV ha reducido significativamente la obtención de resultados falso-negativos en dicho periodo. Contribuyendo así a una práctica transfusional de sangre segura. El límite de detección del ensayo es de 30 a 50 copias/ml por lo que estos agentes pueden ser detectados a partir del quinto día de infección(4,5,50). Por otro lado, la aplicación de técnicas moleculares cuantitativos en el monitoreo de infecciones crónicas ha permitido realizar un seguimiento de la eficacia del tratamiento antiviral en pacientes con HIV, HCV, HBV, encefalitis herpéticas, CMVH, etc. La cuantificación es posible por la inclusión de un patrón de determinación cuantitativa. Este patrón es coamplificado junto a la muestra para corregir variaciones de cada tubo y para determinar la cantidad absoluta del carga viral presente en la muestra. Tanto el patrón y la secuencia blanco son amplificados con los mismos primers para asegurar la eficiencia del ensayo y controlar la posibilidad de falsos negativos por presencia de inhibidores de PCR en la muestra; la detección y cuantificación se realizan mediante ensayo enzimático con el sistema avidinabiotina-peroxidasa (4,5,50,51). El monitoreo de la carga de RNA viral de HIV hoy en día es imprescindible para predecir la progresión de la enfermedad o determinar resistencia al tratamiento que se esta administrando. Del mismo modo, la cuantificación de CMV o HSV para el monitoreo de tratamiento o uso de inmunosupresores en pacientes con enfermedades autoinmunitarias seropositivos o que fueron sometido a transplantes de órganos sólidos o médula ósea. Por la importancia de estas aplicaciones los procedimientos fueron validados, lo que permite mejor control del ensayo. (72) - BIOFARBO

Limitaciones Es muy importante determinar las potenciales limitaciones de la tecnología de amplificación de genoma viral. La reproducibilidad de los ensayos de PCR depende de la experiencia del operador. La especificidad, a la vez, puede ser afectada por posibles contaminaciones que se presenten en cualquiera de las etapas del ensayo, por lo que se recomienda trabajar en espacios separados y manteniendo un flujo unidireccional (1,2,3). La elección de los primers utilizados es de vital importancia, su inespecificidad o la utilización de reactivos que no cumplen las condiciones óptimas pueden generar productos inespecíficos. Todos estos factores influyen en el resultado dando lugar a falsos positivos o falsos negativos; esto es frecuente cuando no se cuenta con protocolos de extracción adecuados que permitan excluir sustancias que puedan actuar como inhibidores. De la misma forma un volumen pequeño de muestra o una baja carga viral podrían determinar falsos resultados (1,2,3,51). El ensayo de PCR puede detectar genoma viral eficientemente, pero no puede diferenciar si estamos en presencia de virus viable con capacidad infectiva y por consiguiente con capacidad de generar enfermedad o se trata de trazas de material genómico viral. Por esto al igual que todos los procedimientos de diagnóstico, estos deben ser interpretados conjuntamente los análisis de apoyo y el diagnóstico clínico (1,2,51).

CONCLUSIONES Se ha tratado de resumir la utilidad de la aplicación de los métodos moleculares en el diagnóstico de infecciones virales, donde la PCR juega un papel importante. Si bien en algunas circunstancias el uso aún esta en estudio, en un futuro cercano servirá de un soporte importante para determinar la etiología de muchos casos clínicos. La detección de virus mediante técnicas moleculares es una herramienta que cada vez va tomando mayor importancia, por su capacidad de detección en un tiempo relativamente corto, la alta especificidad y sensibilidad y la posibilidad de detectar varios virus a la vez (1,2,3,4,44,51,52). La facilidad de obtener los reactivos, las sondas, el desarrollo de los procedimientos, el uso de controles y la validación de ensayos así como los estudios de correlación de diagnóstico con métodos convencionales han permitido la introducción de esta tecnología a varios laboratorios para el diagnóstico de varias patologías virales. Si bien las ventajas que presentan las técnicas moleculares, especialmente la PCR, han permitido catalogarla como la técnica gold estándar para algunas patologías víricas, el proceso de estandarización aún tratándose de productos comerciales debe ser realizado por cada laboratorio, para ofrecer resultados con alto grado de confiabilidad. Vol. XII - Noviembre de 2004

DIAGNOSTICO MOLECULAR DE INFECCIONES VIRABLES

Por todo lo expuesto, en la actualidad el uso de técnicas moleculares como parte de las herramientas del laboratorio de Virología para el diagnóstico de varias patologías víricas es una realidad. En nuestro medio, la necesidad de contar con estos ensayos es creciente, toda vez que existen mayores evidencias que respaldan el rol de los agentes virales en varias patologías prevalentes y de importancia local. El interés no solo se limita al campo de la investigación sino también incluye el diagnóstico clínico. Acceder a un diagnóstico eficiente es importante para una intervención oportuna; por esto es necesario encaminar esfuerzos a la implementación de estos procedimientos con la finalidad de ampliar y mejorar los recursos diagnósticos y de monitoreo de las enfermedades virales en nuestro medio, haciendo posible su acceso.

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DIAGNOSTICO MOLECULAR DE INFECCIONES VIRABLES

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