Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica

Universidad de Guadalajara Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingenierías Lic. Ingeniería en alimentos y biotecnología

Alumno; Luis Gabriel Guillen Martínez Código; 212012381 “Actividad enzimática de Carnitina acil-transferasa I y Su función biológica en el organismo.”

Nombre del Asesor(es); Mtro. En C. Daniel Escobar Hernández Lic. En Química Israel Agustín Altamirano Montaño

Modular; M2 (Métodos matemáticos) y M3 (Cinética y Química) Ciclo Escolar; 2016 B

Guadalajara, Jalisco, México. 30 de Noviembre de 2016

Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016

Índice de Contenido 1. Introducción .................................................................................................. 3 2. Objetivo General ........................................................................................... 5 3. Antecedentes .............................................................................................. 5 4. Β-Oxidación .................................................................................................. 6 5. B-Oxidación mitocondrial .............................................................................. 6 6. ¿Qué es la enzima CTP I? ........................................................................... 9 7. Sustratos .................................................................................................... 10 8. Función biológica ..................................................................................... 11 9. Inhibición enzimática reversible .................................................................. 12 10. Inhibición de CTPI por malonil-CoA ............................................................ 15 11. Resultados;................................................................................................. 16 12. Conclusiones; ............................................................................................. 18 13. Bibliografía.................................................................................................. 19

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Introducción Para ser utilizados por los animales y humanos como fuente de energía y agua metabólica, mediante su metabolismo oxidativo, los ácidos grasos, procedentes de los triacigliceroles de la dieta o los almacenados en el tejido adiposo, o producidos por algunos órganos que los exportan a otros, deben seguir una serie de metabolismos para que estos puedan ser degradados y convertidos en moléculas de ATP y utilizarlos como energía. Existen situaciones patológicas en los seres humanos que hacen que funciones relacionadas con sustancias y bioreacciones con la carnitina no se lleven a cabo, esto provoca repercusiones graves. La sustancia de carnitina también es empleada en el ámbito deportivo y nutricional, siendo esta usada como un sustrato para que estas enzimas puedan dar la catálisis con más posibilidades, esto acelera y mejora el paso de estos ácidos grasos, haciendo más rápida su descomposición y su utilidad como fuentes de energía. La β-oxidación mitocondrial es uno de estos, tiene lugar en la matriz mitocondrial, por ello los ácidos grasos activados como acil graso CoA deben atravesar la membrana mitocondrial interna. Los ácidos grasos de más de 10 carbonos necesitan la presencia de carnitina y de un sistema transportador, la translocasa acilcarnitina- carnitina, que lleva a cabo un proceso de anti porte. Las carnitina acil-transferasa I y II están, respectivamente, en las caras externas e internas de la membrana mitocondrial interna. Este proceso intermedio en la oxidación que a pesar de que es breve y de mecanismo sencillo de entender, es vital para dar paso a que se realice el proceso metabólico. Esto podría ayudar a personas con trastornos alimenticios como la obesidad a tener un control o seguir un tratamiento, pero debido a que se conoce poco sobre esta parte de la beta oxidación, solo engloba la sección o mercado deportivo, siendo este el que tiene más cabida, ya que existen gran variedad de laboratorios que producen y venden en presentaciones liquidas y en pastilla, la amina L-

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Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016 carnitina y acetil carnitina, siendo esta un quemador de baja intensidad pero efectivo para el desarrollo y rendimiento en cualquier actividad física. Si se estudiara más esta parte, sería una ventaja contra padecimientos degenerativos como la diabetes, la cual tiene como factores pre la obesidad. En esta investigación se abordarán las catálisis de las enzimas, así descubriéremos algunos mecanismos de reacción que nos ayudaran a saber cómo se comportan estos compuestos en nuestro cuerpo y como poder aprovechar al máximo en la aplicación medica preventiva y nutricional.

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Objetivo General Estudiar y conocer los mecanismos de reacción y catálisis enzimática de la enzima Carnitina acil-transferasa I. Recaudar información acerca de su comportamiento, utilizando las metodologías adecuadas para un ensayo experimental de su catálisis y su mecanismo de reacción. Esto con el objetivo de analizar su comportamiento en la membrana mitocondrial, que servirá para estudios posteriores. Conociendo el comportamiento de esta enzima también se busca implementar mejoras y la creación de nuevos tratamientos utilizando y aplicando suplementos alimenticios para el tratamiento de la obesidad y sobrepeso tanto en adultos como el infantes, también con función de prevención de enfermedades como la diabetes.

Antecedentes IMPORTANCIA DE LA CARNITINA EN EL ORGANISMO; La importancia de la L-carnitina en los organismos tanto animales como vegetales es alta, adicionalmente, su uso como suplemento para el tratamiento de varias enfermedades es evidente. Una deficiencia puede llevar a consecuencias negativas, por lo que el consumo de una dieta rica en ésta es primordial. Establecieron sus funciones biológicas en la β-oxidación de las grasas, y en 1973 fue cuando se describió su importancia nutricional y deficiencia en pacientes. Se conoce a la carnitina químicamente como 3-hidroxi-4-trimetilaminobutirato, fue hasta mediados de los años 50 cuando se demostró que el principal papel de la carnitina es acelerar el proceso de oxidación de ácidos grasos (y de esta manera la ulterior producción de energía). La deficiencia de Carnitina conduce a una disminución sustancial de la producción de energía y al aumento de masa del tejido adiposo.

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Β-Oxidación La β oxidación es un proceso catabólico de los ácidos grasos en el cual sufren una remoción, mediante la oxidación de un par de átomos de carbono sucesivamente en cada ciclo del proceso hasta que el ácido graso se descompone en cada ciclo del proceso en formas de moléculas de acetil-CoA, posteriormente serán oxidados en la mitocondria para generar energía química en forma de ATP. El nombre de este proceso se debe precisamente a que la

(Figura 1).Este proceso catabólico consta de 4 reacciones principales; 1-Oxidacion, 2-Hidratacion, 3-Deshidrogenacion, 4- Ruptura de los enlaces para un nuevo ciclo.

introducción del oxígeno tiene lugar en el carbono B (3 en la nomenclatura) del ácido graso ya

que tradicionalmente se ha denominado carbono alpha al adyacente del grupo carboxilo.

B-Oxidación mitocondrial Las mitocondrias contienen

tres acil-CoA deshidrogenasas con

especificidades para cadenas largas, medianas y cortas de ácidos grasos (unidos a acil-CoA). La reacción catalizada por estas enzimas conlleva la remoción de un protón del carbono  y la transferencia de un hidruro al carbono  del FAD.

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Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016 Para poder entrar a través de la membrana mitocondrial, estas se topan con el mecanismo de la carnitina la cual se divide en varias etapas, como se muestra en lo siguiente;

ACTIVACIÓN Y ENTRADA EN LA MITOCONDRIA: (FIGURA 2)

(Figura 2). Entrada y activación del ácido graso a la mitocondria a través de la membrana externa e interna.

Para poder entrar a través de la membrana mitocondria interna el acil-CoA necesita atravesar un mecanismo de entrada y salida, el cual es regulado por las siguientes enzimas y sustratos; 1. Acil CoA sintetasasa (hay 3 isoenzimas diferentes, especializadas en ácidos grasos de cadenas larga, media y corta, respectivamente). 2. AcilCoA:carnitina acil-transferasa I (cara externa de la membrana mitocondrial interna) 3. Acil CoA: carnitina acil-transferasa II (cara interna de la membrana mitocondrial interna) 4. Cotransportador carnitina: acilcarnitina 5. Pirofosfatasa inorgánica.

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Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016 Los acil-CoA son compuestos de alta energía, su hidrolisis a ácido graso libre y CoA lleva apegada una variación grande y de signo negativo de energía libre (δG= -31kj/mol). La formación de ácido graso se hace más favorable por la hidrolisis de dos enlaces es alta energía en el ATP; el pirofosfato es hidrolizado inmediatamente por una segunda enzima la pirofosfato inorgánico hidrolasa, que empuja la activación en dirección de formación de acil-grasoCoA. La reacción global es;

ΔGº = 32,5 kj/mol Aunque el ADP constituye el producto de muchas reacciones celulares que emplean el ATP, y el ADP es el aceptor directo del fosfato en las reacciones productoras de energía de la glicólisis y de la fosforilación oxidativa de la mitocondria; en muchas de las reacciones que utilizan el ATP en la célula los dos grupos fosfato terminales de éste se separan conjuntamente en forma de pirofosfato y se libera AMP como producto.

El pirofosfato inorgánico es un compuesto fosfato de nivel energético elevado que posee un ΔGº de hidrólisis comparable al fosfato terminal del ATP. Para regenerar el ATP a partir de PPi y AMP intervienen dos enzimas auxiliares: la Pirofosfatasa inorgánica y la adenilato-quinasa. Hay dos clases de compuestos fosforilados que poseen una ΔGº de hidrólisis más negativa que la del ATP: 1. Los compuestos fosfato que se forman durante la ruptura enzimática de moléculas combustibles. 2. Los compuestos fosfato utilizados como almacenadores de la energía del enlace 14 fosfato.

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Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016 Los dos miembros más importantes de la primera clase son el 1-3 difosfoglicerato y el fosfoenol piruvato, los cuales se forman durante la fermentación anaerobia de la glucosa (glucólisis).

ΔGº -7.3 kcal

ΔGº -4.5 kcal

Total -11.80

kcal Los compuestos fosfato de elevado nivel energético, que actúan como reservorio de la energía de enlaces fosfato, reciben con frecuencia el nombre de fosfágenos. Los dos fosfágenos principales son la fosfocreatina hallada en muchos vertebrados, y la fosfoarginina, presente en muchos invertebrados. Ambos se forman a partir de la creatina y de la arginina por transferencia de grupos fosfato desde el ATP en reacciones catalizadas por la creatin-fosfoquinasa y la argininfosfoquinasa, respectivamente. Ambas reacciones son reversibles pero el equilibrio se halla desplazado hacia la formación de ATP. Fosfocreatina + ADP creatina + ATP

¿Qué es la enzima CTP I? La carnitina palmitoiltransferasa I (CPT1), también conocida como carnitina aciltransferasa I, CPTI, CAT1, CoA: carnitina acil transferasa (CCAT) o palmitoylCoA transferasa I, es un copolímero mitocondrial responsable de la formación de acil carnitinas catalizando la transferencia del grupo acilo de una cadena larga AcilCoA grasa de coenzima A a l-carnitina. El producto es a menudo palmitoylcarnitina (por lo tanto el nombre), pero otros ácidos grasos también pueden ser sustratos. Es parte de una familia de enzimas llamadas “carnitine aciltransferasas”. 9

Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016 Esta "preparación" permite el movimiento subsiguiente de la acilcarnitinas del citosol en el espacio intermembránico de las mitocondrias. Actualmente se conocen tres isoformas de CPT1: CPT1A, CPT1B, yCPT1C. [ CPT1 es una proteína de membrana integral que se asocia con la membrana externa mitocondrial a través de regiones transmembrana en la cadena peptídica. Ambos los dominios N- y C-terminal se exponen al lado citosólico de la membrana La estructura exacta de cualquiera de las isoformas de CPT1 aún no se ha determinado, aunque se han creado una variedad de modelos in sillico para CPT1 basados en carnitina aciltransferasas estrechamente relacionadas, tales como la carnitina acetiltransferasa (CRAT). Una diferencia estructural importante entre CPT1 y CPT2, CRAT y carnitina octanoiltransferasa (COT) es que CPT1 contiene un dominio adicional en su Nterminal que consiste en aproximadamente 160 aminoácidos. Se ha determinado que este dominio N-terminal adicional es importante para la molécula inhibidora clave de CPT1, malonil-CoA.

Sustratos Los sustratos con los que esta enzima interactúa son el acil graso CoA (de ahí su nombre como acil-transferasa) o cualquier ácido graso de cadena larga, que este activado previamente para entrar a la beta oxidación. El otro sustrato usado para el transporte de ácido graso es la carnitina, es una amina cuaternaria sintetizada en el hígado, los riñones y el cerebro a partir de dos aminoácidos esenciales, la lisina y la metionina. La carnitina ayuda a las bacterias a soportar el estrés osmótico debido a bajas temperaturas o la salinidad. En los eucariontes, la carnitina se encarga de llevar los grupos acilo al interior de la matriz mitocondrial. Se han propuesto dos sitios de unión distintos en CPT1A y CPT1B. El sitio "A" o "sitio CoA" parece unirse tanto al malonil-CoA como al palmitoil-CoA, así como a 10

Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016 otras moléculas que contienen coenzima A, lo que sugiere que la enzima se une a estas moléculas mediante la interacción con el resto coenzima A. Se ha sugerido que malonil-CoA puede comportarse como un inhibidor competitivo de CPT1A en este sitio. Se ha propuesto un segundo "sitio O" para unir malonil-CoA más fuertemente que el sitio A. A diferencia del sitio A, el sitio O se une al malonil-CoA a través del grupo dicarbonilo del resto malonato de malonil-CoA. [1]

Función biológica El sistema carnitina palmitoiltransferasa es un paso esencial en la beta-oxidación de ácidos grasos de cadena larga. Este sistema de transferencia es necesario porque, mientras que los ácidos grasos se activan (en forma de un enlace tioéster a la coenzima A) en la membrana mitocondrial externa, los ácidos grasos activados deben ser oxidados dentro de la matriz mitocondrial. Los ácidos grasos de cadena larga como palmitoyl-CoA, a diferencia de los ácidos grasos de cadena

(Figura 3). Este proceso de entrada el limitante para la velocidad de oxidación de los difundirse acido grasoslibremente en la mitocondria corta y media, no pueden a través de la membrana interna

mitocondrial, y requieren un sistema de lanzadera para ser transportados a la matriz mitocondrial. La carnitina palmitoiltransferasa I es el primer componente y la etapa limitante del sistema carnitina palmitoiltransferasa, catalizando la transferencia del grupo acilo de la coenzima A a la carnitina para formar palmitoil carnitina. Una translocasa

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Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016 luego transporta la acilcarnitina a través de la membrana mitocondrial interna donde se convierte de nuevo en palmitoyl-CoA. Los esteres del acil graso-CoA formados en la membrana mitocondrial externa no cruzan la membrana mitocodrial interna intactos. El grupo acil graso se une transitoriamente al grupo hidroxilo de la carnitina y la acil carnitina es transportada a través de la membrana interna por un transportador específico. En esta segunda reacción enzimática es necesaria, para el paso de los acidos grasos hacia el interior de la mitocondria la carnitina acilranferasa I presente en la cara externa de la membrana interna, esta cataliza la transesterificación del grupo acil graso desde la coenzima A hasta la carnitina. Esta cruza la membrana interna mediante una difusión facilitada por el transportador acilcarnitina-carnitina.

Inhibición enzimática reversible La unión de la enzima a un sustrato e inhibidor es una inhibición enzimática reversible y puede ser representado en la siguiente figura;

(Figura 4) Mecanismo de enzima, sustrato e inhibidor

La enzima libre (E) es capaz de reaccionar con el sustrato (S) para formar el complejo enzima-sustrato (ES), o con el inhibidor para formar el complejo enzima Inhibidor (EI), además de poder formar los complejos terciarios de enzimasustrato-inhibidor (ESI). Por lo tanto hay 4 reacciones a considerar cada una teniendo su propia constante de disociación siendo estas Km, αKm, Ki y αKi en el diagrama, como referencia de estas, se enumeran en la figura anterior. 12

Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016 Existen varios tipos de inhibidores; competitivos, no competitivos acompetitivos o mixtos.No todos los inhibidores son capaces de formar parte de las siguientes reacciones; 1-. Es siempre posible 2-. no es posible con inhibidores competitivos 3-. no es posible con inhibidores acompetitivos 4-. no es posible con inhibidores competitivos o acompetitivos La inhibición reversible puede ser descrita cuantitativamente en términos de la unión del inhibidor a la enzima y al complejo enzima-sustrato, y sus efectos en las constantes cinéticas de la enzima. En el esquema clásico de Michaelis-Menten mostrado abajo, una enzima (E) se une a su sustrato (S) para formar el complejo enzima-sustrato (ES). En la catálisis, este complejo se rompe para liberar el producto (P) y la enzima (E). El inhibidor (I) puede unirse tanto a (E) como a (ES) con las constantes de disociación Ki o Ki', respectivamente. Los inhibidores competitivos se pueden unir a (E), pero no a (ES). La inhibición competitiva aumenta el valor de Km (es decir, el inhibidor interfiere con la unión del sustrato), pero no afecta a la Vmax (el inhibidor no obstaculiza la catálisis en (ES) porque no se puede unir a (ES)).3 Los inhibidores no competitivos tienen afinidades idénticas por (E) y (ES) (Ki = Ki'). La inhibición no competitiva no cambia la Km (es decir, no afecta a la unión del sustrato) pero disminuye la Vmax (es decir, la unión del inhibidor obstaculiza la catálisis).3 Los inhibidores de tipo mixto se unen tanto a (E) como a (ES), pero sus afinidades por estas dos formas de enzimas son distintas (Ki ≠ Ki'). Por lo tanto, los inhibidores de tipo mixto interfieren con la unión del sustrato (incremento de Km) y dificulta la catálisis en el complejo (ES) (disminución de la Vmax)

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Actividad Enzimática de CTP I y su función biológica 2016 Según lo observado arriba, un inhibidor enzimático está caracterizado por sus dos constantes de disociación, Ki y Ki', de la enzima y del complejo enzima-sustrato, respectivamente. La constante del complejo enzima-inhibidor Ki puede ser medida directamente por varios métodos. Un método extremadamente exacto es la calorimetría isoterma de titulación, en donde el inhibidor es titulado en una solución de enzimas y el calor liberado o absorbido es medido. La técnica calorimetría isoterma de titulación ofrece una medida directa a partir de la estequiometría, de la entalpía de formación y de la constante de unión de los enlaces moleculares de manera que es posible calcular la energía de Gibbs de formación del enlace, representada por ΔG, y subsiguientemente la entropía del proceso:

donde Ka es la medida directa de la afinidad de enlace, R es la constante de gases, T la temperatura en kelvin, ΔH la entalpía y ΔS la entropía. Sin embargo, la otra constante de disociación Ki' es difícil de medir directamente, ya que el complejo enzima-sustrato tiene un periodo de vida muy corto y está dando lugar a la reacción química para formar el producto. Por lo tanto, Ki' suele medirse de forma indirecta, observando la actividad enzimática bajo varias concentraciones de sustrato e inhibidor, y ajustando los datos5 a una ecuación de Michaelis–Menten modificada [15]:

donde los factores de modificación α y α' son definidos por la concentración del inhibidor y sus dos constantes de disociación; y

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Inhibición de CTPI por malonil-CoA Con el objetivo de definir el tipo de inhibición que presenta el malonil-CoA con respecto al sustrato de carnitina es un estudio presentado por la universidad de Barcelona (8) se ensayó la actividad de CTP IA salvaje sobre expresada en la levadura, variando las condiciones del sustrato de carnitina (50 a 600µ) en presencia de 0, 10, 15, 50 y 100 µg de malonil-CoA. Se calculan las constantes aparentes de inhibición y disociación por malonil-CoA, a partir de representaciones de Lineweaver-Bruk;

.

Ki se representa como la constante de inhibición que no depende de la concentración de la enzima (E) o del sustrato (S) y se calcula de la representación secundaria. Mientras que Ki=αKi se define como la constante de disociación del complejo enzima-sustrato-inhibidor (ESI) y se calcula con la representación de Nixon; La concentración final para cada componente es [8];

Tabla 1. Concentraciones de ensayo mecanismo de inhibición, Fuente; Estudio de los mecanismos de inhibición de la actividad carnitina politranferasa I [8]

Después, prepararon la mezcla proteínas, las prepararon por duplicado en tubos de 1,5 ml diluyendo la proteína en tampón CTPI 4x y ajustando con 40 microgramos de agua destilada [8];

Tabla 2. Concentraciones del preparado de proteico

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El caso de estudio de la interacción del inhibidor C75-coA en la enzima CTPIA salvaje y mutante CTPI A C608A expresados en levadura, se varían las condiciones de C75-CoA 0,2 a 10 µg en presencia de sustrato de carnitina de 400µg y palmitoil-CoA 50µg[15]. Las constantes aparentes de inhibición y de inactivación (Ki y kinact) fueron determinadas por un método no lineal basado en el método descrito por KitzWilson. Ya que una linealizacion de datos, puede afectar negativamente la precisión de datos. Por ello se utiliza un método no lineal utilizando la siguiente ecuación;

Con un reacomodo de la ecuación Kita-Wilson que describe la perdida de la actividad sobre el tiempo;

Resultados; Los experimentos cinéticos realizados con CTPI A C608A muestran una cinética estándar de saturación hiperbólica tipo Michaelis-Mertens tanto que cuando se varia la concentración de carnitina frente a una concentración constante del segundo sustrato palmitoil-CoA (135µM) como cuando el sustrato que variaba era el palmitoil-CoA y se mantenía constante la concentración de carnitina a 400 µg (Grafica I) [8]

Grafica I. Relación de actividad enzimática del sustrato Palmitoil y Carnitina fuente; Estudio de los mecanismos de inhibición de la actividad carnitina politranferasa I

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Esta tabla nos muestra el valor cinético aparente de Km y Max para los dos sustratos ensayados. El mutante CTPI A c608A presentaba un Km para el sustrato de carnitina de 51.6 µM frente a una Km de la enzima de 117 µMes decir, que la Km de la enzima mutado para carnitina es 2,3 veces menor que para carnitina salvaje indicando que la proteína mutada en esta posición por alamina es más afín que la salvaje.

Tabla 3. Valores de constantes cinéticas de sustratos en relación a las CTP1 mutantes y salvajes. fuente; Estudio de los mecanismos de inhibición de la actividad carnitina politranferasa I

Inhibición por malonil-CoA Se analizó la sensibilidad a malonil-CoA del mutante CTPIA C608A y los resultados de inhibición se compararon con los él enzima sin mutar (Grafica 2). La inhibición por malonil-CoA a concentraciones entre 1 y 200 µM muestras pequeños cambios en IC50 respecto a la proteína salvaje.

Expresaron los plásmidos resultantes en células de levadura y analizaron la actividad enzimática y el efecto de malonil-CoA en las fracciones mitocondriales de cada mutante. Estos se expresaron similares en la mutante y la salvaje. Grafica 2. Sensibilidad de Malonil-CoA fuente; Sin embargo no se pudo expresar actividad en Estudio de los mecanismos de inhibición de un mutante así que no pudieron determinar la la actividad carnitina politranferasa I actividad de inhibición. El análisis de cinéticas de inhibición muestra este mutante se inhibe con dificultad en el rango de las concentraciones del inhibidor ensayadas siendo la actividad residual en 70% a 100µM (Grafica 3B) En cuanto al segundo mutante se perdió un 80% de actividad enzimática con respecto a la enzima salvaje.(Grafica 3ª) [8] 17

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Grafica 3ª y 3B. Actividad enzimática de CTPIA salvaje y las mutantes M593K y M594K y su inhibición por malonil-CoA. Fuente Estudio de los mecanismos de inhibición de la actividad carnitina politranferasa I [8]

Conclusiones; La enzima Carnitina acil-transferasa I es de vital importancia para iniciar el metabolismo de los acidos grasos. En esta recopilación y análisis de la enzima, se pudo observar sus mecanismos de actividad enzimática, su inhibición por malonilCoA es un punto clave para la generación de energía por medio de lípidos. Los sustratos catalizados por esta enzima son factores clave para desarrollar la beta oxidación. Además del acudo graso que se transporta a través de la membrana interna, la carnitina juega un papel esencial en este mecanismo, dada esa importancia es importante incluirla en la dieta diaria, por medio de alimentos o suplementos que la contengan. Pudiendo conocer el comportamiento de esta enzima, a niveles experimentales, podrían surgir nuevas técnicas para la degradación de acidos grasos de cadena larga como lo era el Palmitoil-CoA, esto ayudaría en tratamientos contra la perdida de grasa. Retomando la inhibición, esta evita que se genere la síntesis y la degradación al mismo tiempo, la inhibición separa diferentes metabolismos del cuerpo, haciendo que ocurran en procesos diferentes, para que estos no degraden acidos grasos de cadenas largas como los omegas, necesarios para la actividad cerebral. El estudio de esta enzima pudiera influir en la generación de nuevos productos adicionados para tratar una problemática que en países con alto índice de obesidad como México. Ya que al conocer su comportamiento, pudiéramos adicionar sustrato de esta misma como la amina l-carnitina. Jumex ya habría estado experimentando con este producto en el sector deportivo, pudiendo tener áreas de oportunidad en alimentos infantiles, tratamientos para diabéticas entre otras.

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