Residues and biomarkers, WORKSHOP at CENTRO NACIONAL DE INVESTIGACION DE LA EVOLUCION HUMANA, NOV 2015

Julio Mercader Robert Patalano

Definiciones

Los materiales líticos constituyen un repositorio de residuos depositados en su superficie: orgánicos e inorgánicos

Biomarcadores, fitolitos y almidón permiten estudiar el contexto ambiental, estrategias económicas y dieta

En el campo de investigación que concierne a los micro-residuos orgánicos, se distinguen los de tipo físico (JM) y químico (RP)

Los micro-residuos físicos poseen características morfológicas y métricas que a veces permiten su identificación taxonómica

B R E A D

P A L M

A S P A R A G U S

Los fitolitos y almidones nos informan del contexto ambiental y fuentes alimentarias

W A T E R L I L Y

W I L D B A N A N A

Cuerpos silíceos en el sistema vascular y epidermis de monocotiledóneas, conexión anatómica

Muchas plantas contienen inclusiones a nivel celular; incluyendo fitolitos y almidones Prychid et al 2003

Fitolito desarticulado de su matriz celular original; típico de la familia Poaceae

Formación de fitolitos: La planta absorbe sílice disuelto del suelo (acido silícico) y se polimeriza en dióxido de silicio según es transportado por la savia. La precipitación se manifiesta de forma variada, desde particulas intracelulares a relleno inter-celular o negativo.

• • • • •

Isotrópico Indice de refracción ~1.45 Gravedad específica ~2.3 Contenido variable en nitrógeno, carbono, aluminio, etc. Oclusión de compuestos orgánicos sucede a veces

Es importante no sobreinterpretar zonas opacas, ya que no tienen porque respresentar episodios de quema ni tampoco material orgánico atrapado; a veces son cavidades internas (Alexandre et al 2015)

En general, cladísticamente hablando, los linajes mas derivados producen menos fitolitos; pero hay excepciones

Dolichos spp.

El hecho de que los almidones provengan de partes de la planta comúnmente explotadas por su valor nutritivo y calórico les convierte en un marcador ideal para estudiar paleodietas

Dentro de la célula hay un órgano productor de almidón

POLISACARIDOS, Formados mediante condesación y polimerización de enlaces glucosídicos

De tipo estructural:

celulosa

De reserva energética: almidón lineal

amilosa

Insoluble en agua, semi-cristalina

amilopectina

ramificada

Ciertos rasgos morfométricos pueden permitir la asignación taxonómica REICHERT 1913

BIOMARCADORES Definiciones

Marcadores Biológicos • Fósiles moleculares • Derivan de organismos vivos • Compuestos formados de carbono, hidrógeno y otros elementos

Eglinton and Eglinton, 2008

Dientes

Liu et al., 2015

Queratina

Polen

La cutícula de planta

Biomarcadores • Estructuras complejas de carbono, hidrógeno, y otros elementos • Revelan información sobre biosíntesis

• Fotosíntesis - fuente última de biomasa/biomarcadores • Cera foliácea sintetizadas proporcionan información: – Plantas terrestres – Vegetación continental

Cutícula de insecto moderno

Características • Cada biomarcador es típico de ciertos organismos • Los organismos pueden ser abundantes y generalizados – Plantas – Algas – Bacterias Cutícula de Metasequoia

Características Químicamente estable durante sedimentación y entierro Resistente a la biodegradación Indicador fidedigno de paleoclimas

Lipidos - Cualquier ácido graso (The Biomarker Guide, 2005)

SEM la cutícula de planta

Esquemática de una membrana lipídica (The Biomarker Guide, 2005)

Estructura foliar (www.goldiesroom.org)

(n-) Alcanos Normales

Cáscara sin electrones

Carbono

Capa más externa del electrón (puede contener 8 electrones)

Protones (6) Neutrones (6)

Electrones (2)

Carbono Hidrógeno Electrones de Carbono Electrones compartidos

CH4 - Metano

Alcanos Normales Moléculas estables de carbono e hidrógeno que contienen enlaces simples. Disposición lineal de átomos de carbono.

C8H18

Lípidos

(http://www.bbc.co.uk)

Componentes Lipídicos n-alkane - CH3(CH2)nCH3 CnH2n+2 - C25H52 or C25

n-alkanol - CH3(CH2)nCH2OH

n-alkanoic acid - CH3(CH2)nCO2H

Cadena corta (C17-C21) - algas Cadena mediana (C21-C25) - flotantes Cadena larga (C27-C35) - vegetación terrestre

Isótopos Estables

Fluctuaciones Ambientales Isótopos estables de esmalte/colágeno en paleosedimentos δ13C

δ18O

δ15N

δD

δ34S

C3 vs. C4 plantas

Dependencia del agua

Nivel trófico

Nivel trófico

Indicador geográphico

Precipitación

Red alimentaria

Temp. relativa Hielo glacial

Humedad relativa Temp. relativa

Isótopos Estables Ligeros y Pesados • Fuente de δ13C y δD • δ13C - relación entre carbono-13 y carbono-12 – Expresado 13C/12C

• δD - relación entre hidrógeno -2 y hidrógeno-1 – Expresado D/H or 2H/1H – D = Deuterium o hidrógeno pesado

CO2 Atmosférico

H2O Ambiental

Incorporacíon Respiracion

Fotosíntesis

Metabolismo y Biosíntesis

Yang and Leng, 2009

Carbono

Hidrógeno

• Tipo de planta

• Disponibilidad de agua

• Eficiencia en el uso de agua

• Precipitación

• Temperatura relativa

• Humedad relativa/aridez

• La abundancia relativa de C3/C4 plantas

• Evapotranspiración de la hoja y humedad del suelo

ANTES DE INTERPRETAR…

…Se debiera normalizar la evidencia acorde a criterios de producción, conservación y muestreo diferencial

Una parte considerable del sílice disuelto en cursos de agua proviene de fitolitos, en proporciones mayores a las que resultan incluso de la propia erosión de silicatos

• Salinidad y alcalinidad aceleran la disolución • Fitolitos maduros resisten más que los jóvenes

Loucaides et al 2008

Producción 735 especies analizadas por Hodson et al 2005 demuestran:

• Criterio taxonómico más importante: Orden al que pertenece la planta (3/4 partes de la variabilidad) • Predeterminación genética (y no tanto ambiental)

Pandanales

Fabales

Magnoliales

Poales

Este tipo de generalización no debe sustituir a la constatación en el área geográfica de estudio de las variables particulares que caracterizan al lugar en cuestión

PORCENTAJE SILICEO EN 20 ESPECIES ARBUSTIVAS ~20%

PORCENTAJE SILICEO EN 20 ESPECIES HERBACEAS

~20%

Máximo productor herbáceo genera misma cantidad de fitolitos que el arbóreo A pesar de ello, en general, el peor productor de las herbáceas genera bastante más que la mayoría de los árboles: 3 veces y media Factor de normalización herbáceo /arbustivo en esta zona geográfica: 3.5

Fitolitos del Eoceno y Plioceno

Es innegable que estos marcadores resisten el paso del tiempo, representan la vegetación local y se documentan en contextos donde otras partículas como el polen no se han conservado

Estereotipo

Dixit y Van Cappellen 2002 demuestran que según avanza la edad del fitolito la reactividad a la disolución disminuye; lo cual confirman Loucaides et al 2008, y recientemente Cabanes et al 2011 y 2015.

Contextos arqueológicos enterrados rápidamente y en profundidad, lejos del suelo más superficial donde el agua circula, conservan más fitolitos

Cabanes et al 2011:

…No todos los morfotipos se conservan igual

Esferas/ápices

rondeles

Conocer la producción y conservación de fitolitos procedentes de materiales botánicos es importante, pero de por sí no explica el sesgo inherente que conlleva la incorporación de fitolitos a la litosfera

EL PRIMER SESGO A CONTEMPLAR ES LA CAPACIDAD DE UN ECOSISTEMA DE REFLEJAR SU ESTRUCUTRA, COMPOSICION Y NATURALEZA A TRAVES DEL CONJUNTO DE FITOLITOS QUE SE INCORPORA A LA LITOSFERA

EN SEGUNDO LUGAR, CADA ECOSISTEMA MODERNO SE CONSTITUYE EN MARCO REFERENCIAL PARA INTERPRETAR PAISAJES ANTIGUOS. TAL ANALOGO SE CARACTERIZA POR LA PRESENCIA DE CIERTOS MORFOTIPOS EN PROPORCIONES CONCRETAS

EN TERCER LUGAR, SE ESTABLECEN CORRELACIONES FEHACIENTES ENTRE VARIABLES

Típicos materiales orgánicos que se conservan bien suelen estar mineralizados de por sí: huesos, dientes

PUNTO DE VISTA TRADICIONAL

Moléculas lábiles son destruidas rápidamente por microbios, especialmente durante la fase de deterioro inicial (Kelleher et al 2006) …DEL DETERIORO INICIAL A LA ESTABILIZACION

Existen mecanismos de conservación molecular orgánica que no se ajustan a la definición convencional de fosilización: Gupta y Briggs 2011

1. Proteccion derivada de encapsulamiento (cascara/semilla)

Baxter, R.W., Paleozoic Starch in Fossil Seeds from Kansas Coal Balls. Transactions of the Kansas Academy of Science 1964. 67(3): p. 418-422.

2. Secrección de substancias alifáticas derivadas de lípidos: forman barreras recalcitrantes

Gupta, N., et al., Rapid incorporation of lipids into macromolecules during experimental decay of invertebrates: initiation of geopolymer formation. Organic Geochemistry, 2009. 40: p. 589-594. Gupta, N.S., et al., Experimental evidence for the formation of geomacromolecules from plant leaf lipids. Organic Geochemistry, 2007. 38: p. 28-36.

3. Formación de película hidrofóbica (tras adsorción a superficies minerales)

Collins, M.J., A. Bishop, and P. Farrimond, Sorption by mineral surfaces: Rebirth of the classical condensation pathway for kerogen formation? Geochimica et Cosmochimic Acta, 1995. 59(11): p. 2387-2391.

4. Características geoquímicas del medio sedimentario, la presencia de oxígeno/compuestos quimo-botánicos que retardan el proceso de hidrólisis molecular 5. Encrustamiento de sustancias botánicas a través de cementos exudados por microbios

Al aire libre, las comunidades microbianas se especializan en la degradación de materiales recalcitrantes como la celulosa

AIRELIBRE

AIRELIBRE

CUEVA CUEVA

Bacteria; Chloroflexi

32.1

24.7

1.2

5.6

Bacteria; Proteobacteria

17.3

21.3

4.5

11.9

Bacteria; Actinobacteria

14.8

14.7

72.7

29.9

Bacteria; Firmicutes

11.8

6.1

14.9

2.9

Bacteria; Acidobacteria

8.2

12.1

0.7

12.9

Analisis de ADN : P. Dunfield and A. Brady

En cuevas, las comunidades se especializan en el consumo de amoniaco

Degradación molecular y communidades microbianas a largo plazo: Experimentación bajo condiciones de laboratorio controladas

• • • • • • • • •

Nanoesferas (tamaño: arena, limo, arcilla) pH, Variable H2O: 10% Fe2O3 (≤5µm) SiO2 (1-10µm) NO3 , PO4 Organismo: Hypoxis sp. Inoculum microbiano conocido Intervalos regulares: microscopía y ADN

Ev 25 0 10

Hp

Morfotipos=9 Prominente=3 “Distintivo”= 8% Unico=0

0 13 1

100

2

0

124

0

2

0

3

0

18

1

8

1

1

1

0

101 61 2 0 302

Morfotipos=13 Prominente=2 “Distintivo”= 6% Unico=0

120 1 4 3 300

“La molecula orgánica conservada no es igual a su correlato moderno. Difiere en el grado de alteración causado por agentes microbianos y modificación diagenética.”

Tafonomía

Fósiles bien conservados proporcionan evidencia taxonómica que permite reconstruir el proceso de fosilización y paleoambientes.

Paleontología Molecular Materia orgánica preservada

Fósiles del Mioceno de Clarkia, Idaho (15-20 Ma)

Metasequoia fósil y moderna

Los biomarcadores conservados no son moléculas intactas. Sujetas a degradación y alteración.

Metasequoia wood tissues chromatograms (Yang et al., 2005)

Gansu, China Gran Muralla

Paleoceno – Eoceno

Eoceno

Imágenes de microscopía electrónica: secciones de Metasequoia, mostrando tejidos foliares (Yang et al., 2005).

Mioceno

Mioceno

Mioceno

Plioceno

Plioceno

Plioceno

SEM: conservación estructural de tejidos foliares en coníferas (Witkowski et al., 2012).

n-Alcanos son resistentes a la degradación Dispersos por el medio ambiente Estructuras básicas permanecen intactas durante la sedimentación y diagénesis

Sedimentos con 15 Ma contienen n-alcanos

Cutículas de escorpión Cody et al., 2011

Eurypterus dekayi (ca. 417 Ma) Gupta et al., 2007

Lípidos y n-Alcanos en Olduvai

Composiciones isótopicas de biomarcadores se conservan durante la diagénesis

(Complicaciones: abundancia y descomposición)

Conviene adoptar un enfoque múltiple: del mismo sedimento analizar varios tipos de evidencia

• Frida Leakey Korongo West (FLK-W), 1.8-1.72 Ma • Depósitos fluviales y coluviales • Lower Augitic Sandstone (LAS), 1.5 Ma • Bird Print Tuff (BPT), 1.5-1.3 Ma • Bell’s Korongo (BK), 1.3 Ma

FLKW Lvl 6 I

SHK Flood Plain I ‘Ext’

Cuál es la relevancia de estas técnicas en el panorama actual de la prehistoria más antigua y qué tipo de preguntas se pueden responder a través de estos marcadores

Los cambios climáticos y dietéticos son componentes fundamentales de todo programa de investigación sobre orígenes humanos

Fitolitos Gozan de mayor tradición y existe un número amplio de trabajos reconstruyendo marcos ambientales del Plioceno y Pleistoceno

Almidones Tienen menor tradición; cantidad de trabajos en épocas antiguas es limitada y con resultados muy polémicos

En estudios de Paleolítico, la evidencia se extrae de:

Fitolitos Almidones • Sedimentos, sin • Residuos líticos demasiados en tandem con ejemplos de traceología residuos líticos

Fitolitos

En el miembro Aramis, la información fitolítica sugiere un contexto arbóreo para la ocupación de Ardipithecus ramidus 4.4Ma (WoldeGabriel et al 2009)

En Dmanisi, Georgia, el ambiente reconstruido es una zona abierta, relativemente templada, cubierta de gramíneas 1.8Ma (Messager et al 2010)

Olduvai, Bed I: ~ 1.8Ma

Ambientes de tipo mosaico han sido registrados por los fitolitos publicados por Barboni et al (2010) y Albert et al (2015)

Uno de los artículos más precoces en utilizar residuos de fitolitos para intentar explicar la funcionalidad de las hachas de mano achelenses, Peninj 1.6-1.5Ma, fue el de Domínguez-Rodrigo et al 2001

En el Awash, Etiopía, la ocupación de la MSA durante las fases iniciales del Pleistoceno Reciente sugieren áreas cubiertas de herbáceas adaptadas a la sequía y también palmeras (Barboni et al 1999)

En el Rift de Malawi, los fitolitos del Pleistoceno Reciente inicial demuestran una ocupación de contextos forestales y arbustivos (Mercader et al 2013)

Durante la última década han proliferado los modelos teóricos que sugieren una gran antigüedad y relación de co-dependencia entre el uso de tubérculos/carbohidratos y el control del fuego con objetivos culinarios: Dioscorea, Hypoxis

ALMIDONES

Tambien nos interesan , porque sugieren: • Intensificación en la utilización de recursos • Planificación • Conocimiento de la fenología / estacionalidad de los recursos • Dietas expansivas, complejas, modernas

Importancia

Presión adaptativa ejercida por cambios: Climas

Hábitat Dieta

Relacioń entre clima y evolucioń se entiende a traves de reconstrucciones isótopicas.

Lo Que Sabemos • Vegetación Continental • Dieta

• Isótopos de carbono y oxígeno – Esmalte de dientes – Paleosuelos – Sedimentos marinos

• Datos insuficientes

Lo Que No Sabemos • Indicadores de cambio ambiental • Isótopos de carbono e hidrógeno procedentes de lípidos • Pirólisis y preservación • Uso de herramientas y procesamiento de alimentos

Dada la buena conservación de n-alcanos se suelen utilizar para entender paleoambientales y el contexto climático.

Pirólisis cromatografía de gases espectrometría de masas (Py-GC-MS) técnica analítica principal para comprender la conservación y abundancia en muestras fósiles. Pero, rara vez se ha aplicado en estudios de paleoantropologío.

Espectro pirolítico de cálculo dental de El Sidrón Cueva (Hardy et al., 2012)

Los autores identifican compuestos de carbohidratos

Alta-Temperature Cromatografía de Gases y Detector de Llama por Ionización

Olduvai, Cuestiones Sin Resolver: • Estado de conservación • Paleoclima • Proximidad a fuentes de alimento, agua • Residuos, herramientas, pirólisis

Indicadores Directos n-Alkanos

Evaluar los cambios en:

δ13C + δD

Función principalmente como sustitutos de:

La disponibilidad de agua

Paleohydrology La temperatura Tipo de vegetación Fuente biosíntesis

Paleovegetation

El registro combinado de nalcanos e isótopos de carbono e hidrógeno refleja el impacto que el clima tuvo sobre la evolución.

Biomarcadores e isótopicas firmas para la materia orgánica preservada en sedimentos lacustres en Olduvai Gorge I (Magill et al., 2013).

Paleodietas Caracterización molecular de cultivos y plantas silvestres

Gupta et al., 2013

Análisis molecular de residuos en líticas del Pleistoceno

Pirólisis y Materiales Culturales • Ceras

Seda

• Resinas Naturales

• Ámbar • Aceites y Grasas • Polímeros sintéticos

• Proteínas Tsuge et al., 2000

Los residuos orgánicos en el campo de la paleoantropología tienen credibilidad limitada

Polémica en Paleontología Molecular • • • •

Acidos nucléicos Proteinas Lípidos Carbohidratos

a) Entendimiento escaso de la durabilidad b) Dificultad en distinguir moléculas antiguas y contaminación c) Identificación taxonómica poco fiable

… ¿Y QUE TIENE ESTO QUE VER CON LAS ESTRATEGIAS DE CAMPO PARA RESIDUOS LITICOS?

ENFOQUE HABITUAL: • RECOGER MUESTRAS DURANTE EXCAVACION • REMITIRLAS A ESPECIALISTA EN RESIDUOS

PROBLEMA SUBSIGUIENTE: LAS CUESTIONES METODOLOGICAS QUE SURGIRAN DURANTE LA INTEPRETACION DE LOS MATERIALES NO PUEDEN SER RESUELTAS SIN HABER PLANEADO DE ANTEMANO LA ESTRATEGIA DE CAMPO QUE PERMITE RESOLVERLAS

¿Cuáles son tales cuestiones metodológicas?

• Procede de niveles superiores/suelos • Procede de matriz que rodea al artefacto • Introducido por personal de excavación (ropa, instrumentos, bolsas) • Transportado por el aire • Existe como ruido ambiental en todo el paisaje • Depositado sobre la pieza durante exposición previa al enterramiento

SUELOS CONTEMPORANEOS

CIRCULACION AEREA DE CONTAMINANTES

Introducidos y volatilizados por personal investigador y asistentes

Transportados por el aire y depositados en el área de excavación

RECODIDA INMEDIATA DE MATERIALES Y MATRIZ SEDIMENTARIA PEGADA A ELLOS

Residuo depositado por contacto accidental con materiales orgánicos (plantas, animales) antes del enterramiento

EQUIPAMIENTO LIMPIO

Aplicaciónes Técnicas

Cromatografía de Gases (GC) Espectrómetro de Masas (MS) Pirólisis GC-MS (Py-GC-MS)

Cromatografía de Gases Espectrómetro de Masas Gas Chromatography Mass Spectrometry (GC-MS)

GC-MS 1. Separación de compuestos

2. Transldo a cámara de ionización 3. Ionización 4. Análisis de masas

5. Detección de iones el multiplicador de electrones 6. Adquisición, procesamiento y visualización de datos

Detector de llama por ionización

Intensidad Relativa

Cromatógrafia/Perfil Espectro Resultante

Ceras foliares epicuticulares = n-alkanos Dicotiledóneas = n-C27 y n-C29 Gramíneas = n-C31

Tiempo Relativo

Análisis Isótopico de Compuestos Específicos Compound-Specific Isotope Analysis (CSIA)

• Valor δ positivo = enriquecimiento de isótopo pesado • Valor δ negativo empobrecimiento • δD = precipitación y humedad

• δ13C = paleotemperatura, utilización de agua • Proporciones isótopicas se miden relativas a un estándar = ‰ δ13C = 1,000 x [(13C/12Csample) / (13C/12CPDB) – 1] δD = 1,000 x [(2H/1Hsample) / (2H/1HVSMOW) – 1]

Síntesis de n-alkanos Cadenas • Corta (C17-C21) - algas

• Mediana (C21-C25) - flotantes • Larga (C27-C35) - terrestre

Sampling Number #-6 #-5 #-4 #-3 #-2 #-1 #0 #1 #2 #3 #4 #5 #6 #7 #8 #9 #10 #11 #12 #13 #14 #15

Depth (cm) 45-50 50-55 55-60 60-65 65-70 70-75 75-80 80-85 85-90 90-95 95-100 100-105 105-110 110-115 115-120 120-125 125-130 130-135 135-140 140-145 145-150 150-155

δ13C C27 -28.6 -28.2

δ13C C29 -29.3 -29.5

δ13C C31 -29.7 -30.9

-31.0 -31.1 -30.8 -31.5 -32.7 -32.1 -31.5 -30.8 -30.6 -31 -30.6 -31.1 -31.1 -31.3 -31.2 -30.5 -31.5 -30.8 -32.5

-32.9 -33.5 -32.2 -33.1 -34.7 -32.9 -33.4 -32.0 -32.0 -32.6 -31.5 -32.0 -32.2

-35.4 -35.5 -36.5 -35.5 -35.6 -34.1 -35.4 -33.6 -33.6 -34.2 -33.5 -33.5 -33.0

-32.7 -32.3 -32.9 -32.7 -33.1

-33.9 -33.8 -34.1 -34.6 -33.3

C3 / C 4 • C3 δ13C – -20 y -37‰

• C4 δ13C – -10 y -19‰

n-alkanos C31 – discriminante C3 / C4

Pirólisis GC-MS (Py-GC-MS) Pyrolysis Gas Chromatography Mass Spectrometry (Py-GC-MS)

La pirolisis / cromatografía de gases / espectrometría de masas (Py-GC-MS) es una técnica analítica fundamental para comprender la conservación y abundancia de materia orgánica en fósiles

Espectrómetro de Masas

Sonda para pirólisis

Composición molecular por termólisis

Ventajas: Preparación mínima Fragmentacioń de ligandos químicos permite generar un cromatograma Aspectos cuantitativos y cualitativos

Muestras Analizables • Forenses

• Materiales arqueológicos

• Suelos/Sedimentos

• Microorganismos

• Fibras naturales y sintéticas

• Plantas

• Petróleo • Energías alternativas

• Aminoácidos / ADN • Pintura

Agilent.com

2mm Quartz Tube Sample placed here Glass Wool

Pirólisis

Relative Intensity

B = Benzene L = Levoglucosan P = Phenols Ps = Polysaccharide Vp = Vinyl phenol

Relative Time

PROTOCOLOS DE LABORATORIO

VARIOS ESPACIOS FISICAMENTE SEPARADOS • AREA DE PREPARACION DE MUESTRAS

AREA DE VESTIMENTA Y ANTESALA

Area de procesamiento

Dispersión de arcillas:

• EDTA (sal disódica): 0,1% (ilitas, montmorrillonitas, etc) • Hexametafosfato sódico: 0,1% (esmectitas) Mezclar durante 24h + ultrasonicado 15 min

Parte del residuo se utiliza para fitolitos y parte para almidones

Solución al 6% durante 10 minutos

Politungsteno sódico manipulado para obtener gravedad específica de 1.6. La muestra se mezcla con un vórtex y luego se centrifuga sucesivas veces para concentrar el residuo

Montaje sobre lámina de microscopio se realiza con mezcla a partes iguales de agua y glicerol

La parte de residuo dedicada a fitolitos requiere ataque con ácidos para reducir minerales de calcio y fosfato; también peróxido de hidrógeno

Politungsteno sódico manipulado para obtener gravedad específica de 2.4. La muestra se mezcla con un vórtex y luego se centrifuga sucesivas veces para concentrar el residuo

Montaje sobre lámina de microscopio se realiza con Entellan New; una resina que se solidifica en 3 días y requiere microscopía antes de secarse

El análisis de residuos requiere un cuidado exquisito en el control de contaminación del laboratorio

Nitrile medium Aloe, Fisher Scientific, FB51965, 11762779 Nitrile large Fisher Scientific, FB69264, 11542723

Nitrile large Aloe Fisher Scientific, FB51967, 11772779 Nitrile large Fisher Scientific, FB69263, 102238821 Evergreen Sensa latex large, EPF2104

• Calgón esta contaminado

• Al mezclarlo con agua, la gravedad específica del producto es muy alta (2.4) y los almidones siendo más ligeros (